Электрофорез, что это такое, для чего и как это делается

Электрофорез - это лабораторный метод, осуществляемый с целью разделения молекул в соответствии с их размером и электрическим зарядом, чтобы можно было поставить диагноз заболеваний, проверить экспрессию белка или определить микроорганизмы..

Электрофорез является простой и недорогой процедурой, используемой в лабораторных условиях и в исследовательских проектах. В зависимости от цели электрофореза может потребоваться проведение других тестов и экзаменов, например, для установления диагноза..

Для чего это

Электрофорез можно проводить для разных целей, как в исследовательских проектах, так и в диагностике, поскольку это простой и недорогой метод. Таким образом, электрофорез может быть выполнен для:

Выявление вирусов, грибков, бактерий и паразитов, причем это приложение чаще используется в исследовательских проектах;
Тест на отцовство;
Проверьте экспрессию белков;
Выявить мутации, полезные, например, при диагностике лейкемии;
Анализировать типы циркулирующего гемоглобина, полезного при диагностике серповидноклеточной анемии;
Оценить количество белков, присутствующих в крови.

В зависимости от цели электрофореза, может потребоваться выполнить другие дополнительные тесты для врача для завершения диагностики.

Как это делается

Для проведения электрофореза необходим гель, который может быть из полиакриламида или агарозы в зависимости от цели, буфера для электрофореза и чана, маркера молекулярной массы и флуоресцентного красителя, в дополнение к оборудованию для ультрафиолетового или светодиодного освещения, также известному как трансиллюминатор..

После приготовления геля необходимо поместить конкретный предмет так, чтобы в геле были сделаны лунки, обычно называемые гребенкой, и дать гелю отстояться. Когда гель будет готов, просто нанесите вещества в лунки. Для этого в одну из лунок должен быть помещен маркер молекулярного веса, положительный контроль, который представляет собой вещество, о котором известно, что это такое, отрицательный контроль, который гарантирует достоверность реакции, и анализируемые образцы. Все образцы должны быть смешаны с флуоресцентным красителем, так как таким образом можно визуализировать полосы на трансиллюминаторе.

Гель с образцами должен быть помещен в ванну для электрофореза, которая содержит определенный буферный раствор, и затем устройство включается так, что возникает электрический ток и, следовательно, разность потенциалов, что важно для разделения. частицы в соответствии с их нагрузкой и размером. Время электрофоретического бега варьируется в зависимости от цели процедуры и может длиться до 1 часа..

По истечении определенного времени можно просмотреть результат электрофоретического прогона через трансиллюминатор. Когда гель помещают под ультрафиолетовое или светодиодное излучение, можно визуализировать структуру полос: чем больше молекула, тем меньше ее миграция, чем ближе к лунке, тем светлее молекула, тем больше миграционный потенциал..

Чтобы реакция была подтверждена, полосы положительного контроля должны быть визуализированы, и ничто не должно быть визуализировано в отрицательном контроле, в противном случае это признак того, что произошло загрязнение, и весь процесс должен быть повторен.

Типы электрофореза

Электрофорез можно проводить для разных целей, и, в соответствии с его назначением, можно использовать несколько типов гелей, наиболее распространенными из которых являются полиакриламид и агароза..

Электрофорез для выявления микроорганизмов чаще используется в исследовательских лабораториях, однако для диагностических целей электрофорез можно использовать для выявления гематологических заболеваний и заболеваний, которые развиваются с увеличением количества белков, являясь основными типами электрофореза. :

1. Электрофорез гемоглобина

Электрофорез гемоглобина - это лабораторная методика, выполняемая для выявления различных типов гемоглобина, циркулирующих в крови, позволяющая определить наличие заболеваний, связанных с синтезом гемоглобина. Тип гемоглобина идентифицируется с помощью электрофореза при определенном рН, в идеале от 8,0 до 9,0, с проверкой картины полос, которую можно сравнить с нормальной картиной, что позволяет идентифицировать наличие аномальных гемоглобинов.

Для чего это сделано: Электрофорез гемоглобина проводится для исследования и диагностики заболеваний, связанных с синтезом гемоглобина, таких как серповидно-клеточная анемия и заболевание гемоглобина С, а также для диагностики талассемии. Узнайте, как интерпретировать электрофорез гемоглобина.

2. Белковый электрофорез

Белковый электрофорез - это обследование, запрошенное врачом для оценки количества белков, циркулирующих в крови, и, таким образом, для выявления заболеваний. Этот тест делается из образца крови, который центрифугируют для получения плазмы, часть крови, состоящая, среди прочего, из белков.

После электрофореза можно визуализировать картину полос и, следовательно, график, на котором указано количество каждой фракции белков, что является основополагающим для диагностики.

Для чего это сделано: Белковый электрофорез позволяет врачу исследовать возникновение множественной миеломы, дегидратации, цирроза, воспаления, заболеваний печени, панкреатита, волчанки и гипертонии в соответствии с паттерном группы и графиком, представленным в отчете об исследовании..

Понять, как это делается и как понять результат электрофореза белка.